2024, 41(10):2778-2787.
摘要:
【目的】观察乌梅丸对糖尿病胃轻瘫(DGP)小鼠的治疗作用及配伍机制。【方法】将69只C57BL/6J小鼠随机分为正常组(12只)和造模组(57只)。采用60%高脂饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法将造模组小鼠构建成DGP模型。成功建模后,将造模组小鼠随机分为模型组、乌梅丸全方组、乌梅丸酸味药组、乌梅丸苦味药组、乌梅丸甘味药组和乌梅丸辛味药组,每组9只。经过28d治疗后,测定小鼠胃排空率、小肠推进率,采用苏木素-伊红(HE)染色观察胃窦病理变化,应用血糖仪检测小鼠空腹血糖(FBS),采用比色法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测胃窦组织胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)含量,采用Western Blot法检测胃窦组织中Kelch样ECH关联蛋白1(Keap-1)、核因子红细胞系2相关因子2(Nrf-2)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(Nqo-1)、超氧化物歧化酶1(Sod-1)蛋白表达量。【结果】(1)与正常组比较,模型组小鼠血清FBS、TG、TC和LDL-C水平显著升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001);与模型组比较,乌梅丸全方组、酸味药组和苦味药组第3、4周末血糖值显著下降(P<0.05或P<0.01或P<0.001),乌梅丸全方组血清TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.05或P<0.01),乌梅丸酸味药组、苦味药组、甘味药组及辛味药组血清TC水平均显著下降(P<0.05),拆方组中仅乌梅丸酸味药组LDL-C水平显著下降(P<0.05)。(2)与正常组比较,模型组小鼠胃窦黏膜层及黏膜下层腺体细胞排列紊乱;与模型组比较,乌梅丸全方组胃窦组织病理损伤得到明显改善,酸味药组、苦味药组DGP小鼠胃窦组织损伤的恢复效果优于甘味药组和辛味药组。(3)与正常组比较,模型组小鼠胃排空率和小肠推进率降低(P<0.01或P<0.001);与模型组比较,乌梅丸全方组、酸味药组及苦味药组胃排空率均显著升高(P<0.05或P<0.001),乌梅丸全方组、酸味药组、苦味药组、甘味药组、辛味药组小肠推进率均显著升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。(4)与正常组比较,模型组小鼠胃窦组织VIP含量显著升高(P<0.01),GAS、MTL含量显著降低(P<0.01或P<0.001);与模型组比较,乌梅丸全方组、酸味药组、苦味药组、甘味药组GAS含量均显著升高(P<0.01或P<0.001),乌梅丸全方组、苦味药组小鼠MTL含量显著升高(P<0.05或P<0.01),乌梅丸全方组、酸味药组、苦味药组、甘味药组小鼠胃窦组织VIP含量均显著降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。(5)与正常组比较,模型组小鼠胃窦组织Keap-1表达水平升高(P<0.05),Nrf-2、Nqo-1和Sod-1表达水平降低(P<0.05或P<0.001);与模型组比较,乌梅丸全方组及苦味药组Keap-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.001),乌梅丸全方组、酸味药组及苦味药组Nrf-2、Nqo-1、Sod-1表达水平显著升高(P<0.05或P<0.001)。【结论】乌梅丸可有效调节DGP小鼠糖脂代谢、改善胃窦损伤、促进胃肠动力,全方药效优于各拆方,其机制可能与酸味药、苦味药、甘味药、辛味药协同配伍增效,且主要通过酸味药和苦味药调节Nrf-2/Keap-1通路进而改善氧化应激损伤有关。