【目的】探讨血必净通过高迁移率族蛋白1（HMGB1）对热应激神经干细胞的保护作用机制。【方法】以43 ℃热刺激60 min建立热应激大鼠脑神经干细胞模型。实验分为7组，即阴性对照组、热应激组、非热应激+血必净（浓度25%）组、热应激+血必净低剂量（浓度5%）组，热应激+血必净中剂量（浓度15%）组、热应激+血必净高剂量（浓度25%）组、热应激+HMGB1抑制剂组。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测细胞增殖能力；采用Ac-DEVD-pNA底物法检测细胞 Caspase-3活性；采用蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白轻链3（LC3）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及凋亡相关蛋白、Caspase-3 表达水平；使用核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒提取细胞胞核、胞浆蛋白，Western Blot 检测胞内及胞浆内HMGB1表达水平。【结果】 选择热应激复温9 h 时间点与血必净高剂量用于后续实验。与阴性对照组比较，热应激组细胞 p62、LC3-up 表达量降低，p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1（胞浆）表达量增高（P＜0.01）；与热应激组比较，血必净处理组（热应激+高剂量血必净）p62、LC3-up、Caspase-3表达量进一步下降（P＜0.01），p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1（胞浆）的表达量进一步升高（P＜0.01）；与血必净处理组比较，HMGB1抑制剂处理组（热应激+HMGB1抑制剂）p62、p-mTOR、LC3、Caspase-3及HMGB1（胞浆）的表达量无显著性差异（P＞0.05）。【结论】 血必净可通过促进HMGB1胞浆转位诱导自噬抑制热应激脑神经干细胞凋亡，从而发挥脑保护作用。

R285.5

广东省中医药局科研项目（编号：20202065）；广州市科技计划项目（编号：202102080465）