【目的】 探讨川芎内酯对结肠癌细胞的抑制作用及其机制。【方法】 ①体外研究：选择SW620和SW480 2种结肠癌细胞株。应用不同浓度的川芎内酯处理细胞 24 h 后，用细胞计数试剂盒 8（CCK-8）检测细胞活力。选择浓度为 0、25、50、100 μmol/L的川芎内酯处理SW620和SW480细胞株，采用克隆形成实验检测增殖能力，采用流式细胞术检测癌细胞凋亡，采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A（p21）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 （Caspase-3）及裂解的Caspase-3（cleaved Caspase-3）的表达，采用流式细胞术检测线粒体膜电位的变化，按照试剂盒说明方法检测超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量，应用显微镜观察SW620和SW480干细胞成球情况，采用Aldefluor分析法检测乙醛脱氢酶（ALDH）活性，采用实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测干细胞标记物Nanog、八聚体结合转录因子4（OCT4）和性别决定域Y蛋白2（SOX2）的表达。②体内研究：裸鼠皮下接种SW480细胞构建荷瘤模型，加药组给予川芎内酯5 mg/kg处理，每5 d检测瘤体积。30 d后，处死祼鼠取出肿瘤称质量，脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）染色检测肿瘤组织细胞凋亡，免疫组织化学法检测肿瘤组织中p21和SOX2的表达，按照试剂盒说明方法检测肿瘤组织MDA和SOD含量。【结果】 与川芎内酯0 μmol/L组比较，川芎内酯50 μmol/L对SW620细胞活力有明显抑制作用（P < 0.05），川芎内酯25 μmol/L对SW480细胞活力有明显抑制作用（P < 0.05）。川芎内酯明显降低结肠癌细胞存活率（P < 0.05），增加细胞凋亡率（P < 0.05），上调p21和cleaved Caspase-3的表达水平（P < 0.05），降低线粒体膜电位，增加SOD的含量（P < 0.05），减少MDA的含量（P < 0.05），减小结肠癌细胞成球直径的大小（P < 0.05），降低ALDH活性及Nanog、OCT4和SOX2的表达（P <0.05）。体内移植实验结果显示，川芎内酯减小肿瘤体积（P < 0.05），增加肿瘤组织中TUNEL阳性细胞数目（P < 0.05），减少p21和SOX2阳性细胞数（P < 0.05），增加SOD的含量（P < 0.05），减少MDA的含量（P < 0.05）。【结论】 川芎内酯在体内、体外均可抑制结肠癌细胞的生长，主要通过诱导氧化应激、破坏线粒体功能诱导细胞凋亡，抑制结肠癌干细胞特性阻止结肠癌发生转移。

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义乌市科学技术项目（编号：19-3-126）