2026, 43(05):1340-1348.
摘要:
【目的】控讨野黄芩苷通过调控肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)M2 样极化抑制卵巢癌(OC)细胞增殖和转移的作用及机
制。【方法】采用佛波酯(PMA)和白细胞介素4(IL-4)诱导人单核细胞株THP-1 向M2 样巨噬细胞分化,获得TAMs。采用细胞
计数试剂盒8(CCK-8)法观察不同浓度(0、40、80、160、240 μmol/L)野黄芩苷对TAMs、人卵巢癌细胞SKOV3 细胞存活力
的影响。采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法观察不同浓度野黄芩苷对TAMs 极化表型M 1 型标志物一氧化氮合酶(iNOS)、分
化簇68(CD68)及M2 型标志物甘露糖受体C 型1(CD206)和血红蛋白清道夫受体(CD163)蛋白表达水平的影响。将人卵巢癌
细胞SKOV3 分为5 组:对照组、TAM 组、野黄芩苷组、野黄芩苷+TAM 组和野黄芩苷+氯化锂(LiCl,Wnt/β-catenin 信号通路
激活剂)组。采用平板克隆实验、Transwell 迁移实验以及细胞划痕实验,分别对细胞的增殖、迁移及侵袭能力进行评估。
Western Blot 法检测各组细胞M 1 型标志物iNOS 和CD68、M2 型标志物CD206 和CD163 及Wnt/β-连环蛋白信号(β-catenin)信
号通路相关蛋白β-catenin、细胞骨髓细胞瘤病病毒原癌基因(c-myc)、细胞周期蛋白D 1(cyclin D1)蛋白表达水平。【结果】TAMs
经过不同浓度野黄芩苷处理后,细胞存活率未发生变化(P>0.05),但细胞中的iNOS 和CD68 的表达水平显著升高(P<
0.05),CD206 和CD163 的表达水平显著降低(P<0.05)。SKOV3 细胞经不同浓度野黄芩苷处理后,细胞存活率显著降低,并
呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组比较,TAM 组的iNOS 和CD68 蛋白表达水平显著降低(P<0.05),CD206、CD163、
β-catenin、c-myc、cyclin D 1 蛋白表达水平,克隆细胞数、穿膜细胞数和划痕修复率显著升高(P<0.05)。与对照组比较,野
黄芩苷组的iNOS 和CD68 蛋白表达水平显著升高(P<0.05),CD206、CD163,β-catenin、c-myc 和cyclin D 1 蛋白表达水平,
及克隆细胞数、穿膜细胞数和划痕修复率显著降低(P<0.05)。与TAM 组比较,野黄芩苷+TAM 组的iNOS 和CD68 蛋白表达
水平显著升高(P<0.05),CD206、CD163,β-catenin、c-myc 和cyclin D1 蛋白表达水平及克隆细胞数、穿膜细胞数和划痕修
复率显著降低(P<0.05)。与野黄芩苷组比较,野黄芩苷+LiCl 组的iNOS 和CD68 蛋白表达水平显著降低(P<0.05),CD206、
CD163,β-catenin、c-myc 和cyclin D1 蛋白表达水平及克隆细胞数、穿膜细胞数和划痕修复率显著升高(P<0.05)。【结论】野黄
芩苷可通过抑制巨噬细胞M2 样极化,重塑肿瘤微环境,抑制卵巢癌细胞的增殖和转移,其作用机制与Wnt/β-catenin 信号通
路的调控有关。